产品目录

本试剂盒采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。

本试剂盒采用常规染色脱色方法累计时间达到2～3小时后可以观察到蛋白条带；采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。

• 可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。
  
• 本染色液和脱色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。
  
• 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于食品或药品。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 常规染色脱色方法：
  
  • 电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。
    
  • 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。
    注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2～4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。
    
  • 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2～3次。
    
  • 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。
    
  • 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4～24小时。期间更换脱色液2～4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1～2小时后即可出现。
    注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。
    
  • 完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。
• 快速染色脱色方法：
  
  • 电泳结束后，取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。
    通常对于胶浓度大于10%的胶比较坚韧，在发生煮沸时不易破损；对于胶浓度小于10%的胶，宜尽量避免煮沸，以免出现胶碎裂的情况。
    
  • 随后在染色液温度较高的情况下，在室温摇床上摇动5～10分钟。
    
  • 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2～3次。
    
  • 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保染色液可以充分覆盖凝胶。
    
  • 微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。
    
  • 随后在脱色液温度较高的情况下，在摇床上摇动5～10分钟。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白条带。
    
  • 更换新鲜的脱色液，重复步骤e和步骤f，直至蓝色背景基本上全部被脱去，蛋白条带染色效果达到预期。
    
  • 完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

• 常规染色脱色方法和快速染色脱色方法的优缺点？
  常规染色脱色方法耗时较长，但检测灵敏度更高，染色效果更加稳定。快速染色脱色方法通常检测灵敏度略低，并且在微波炉加热的过程中有时会出现暴沸导致凝胶碎裂的情况，需特别注意。另外微波炉加热导致的高温会引起染色液和脱色液中的乙酸的挥发，最好能在通风橱中进行。